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                  菌種凍干機的介紹及使用步驟

                  更新時間:2024-01-22瀏覽:84次

                        微生物的保存方法很多,根據不同的微生物菌(毒)株或不同的實驗要求,可選用不同的保存方法,其中常見的有斜面保存法,穿刺保存法、液體石蠟保藏法、沙土管保存法、冷凍保存法、真空冷凍干燥保存法。其中真空冷凍干燥保存法方便復活、保存期長,運輸和保存方便,活菌率高。所以近幾年真空冷凍干燥被廣泛應用在菌種保存領域。

                   
                    駿德儀器實驗室菌種凍干機FD-304是一款專門針對菌種保存而設計的凍干機。利用安剖管架預凍好的樣品直接轉移擺放到凍干倉隔板上即可,容量大,操作簡便。316L醫用級不銹鋼材質方形凍干倉,隔熱保溫效果好,真空性能好,有效避免樣品因干燥過程中升溫過快而發生樣品外形塌陷,活性降低等問題。是研究菌種保存客戶的理想選擇。
                   
                    冷凍干燥是將菌體懸浮液冷凍到冰點以下,從而轉變為固體結晶態,然后在低溫低壓(真空)下使固體升華而脫水的干燥方法。一般干燥處理過程會破壞微生物的細胞膜,引起細胞的大量死亡,因此需要添加保護劑,能夠使菌液密度均一,減少活菌在凍干過程中的機械效應和溶質效應帶來的死亡。因此,在凍干前加入的保護劑配方就成為了至關重要的決定性因素,它既會影響到儲存期細胞的活性以及穩定性,也會影響到復水時細胞存活率。
                   
                    凍干法是長期保存細菌、酵母、真菌、病毒和立克次氏體的標準方法(在凍干前一般要加冷凍保護劑,這樣可使細胞免除在冷凍初期因形成冰晶而造成的損害。ATCC 常規用10%脫脂奶或12%蔗糖作為冷凍保護劑,而美國農業部(USDA)的農業研究服務機構的實驗人員用?;蝰R血清作為微生物的冷凍保護劑(。在菌液中加入甘油和二甲亞砜(DMSO)也可防止冷凍中微生物的死亡,但實際操作中應根據不同微生物決定應用或不用保護劑。
                   
                  保存菌種的步驟主要包括:
                   
                    1、微生物培養,培養獲得健壯的菌種擴培液體。培養時根據菌種選擇不同的培養基。培養到對數期獲得大量健壯的菌種,保證菌體濃度,一般達到109的濃度.
                   
                    2、離心收集菌體。通過離心法從液體培養基中獲得菌體。如果是固體培養基可以直接收集菌落,用保護劑溶解混勻。
                   
                    3、將菌體、脫脂奶粉、海藻糖、蔗糖等保護劑在無菌水中混勻得到含有保護劑的菌體混懸液。
                   
                    4、分裝。將菌體混懸液在無菌環境中分裝到無菌容器中,可以是安瓿瓶、西林瓶、EP、培養皿等。
                   
                    5、預凍,預凍是非常關鍵的。預凍不好,菌體會死亡。要快速預凍,防止產生大冰晶造成細胞死亡。預凍要凍結實,保證預凍充分。
                   
                    6、將預凍好的菌體,放入真空冷凍干燥設備中進行凍干。如果是設備帶預凍功能,也可以直接在凍干機上進行預凍。真空冷凍干燥時間和凍干曲線的 設計要根據菌種的不同和菌體混懸液的濃度等進行設計。凍干好后真空密封保存。

                   

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